HIV Confirmatie
De SPR tip is opgedeeld in 2 delen: het bovenste deel van de binnenwand van de SPR tip is gecoat met monoclonaal anti-p24 antilichamen (voor de detectie van p24 antigen), terwijl het onderste deel gecoat is met HIV1gp160proteine en HIV1 groep O en HIV2 specifieke synthetische peptiden (voor de detectie van HIV1 en of 2 antilichamen).
Eerst vormt Ag aanwezig in het serum een sandwich met het anti-p24 gecoat aan de SPR wand en met het enzymatisch gelabeld anti p24 in het reagens in de test strip. In een tweede stap binden de antigenen gecoat op het onderste deel van de SPR tip met de antilichamen in het serum en met enzymatisch gelabelde peptide in het reagens in de test strip.
In de reagens strip is tevens een optische kuvet aanwezig met daarin het substraat 4 MUP. Als het enzyme gebonden is aan de binnenwand van de SPR tip wordt 4MUP omgezet in Umbelliferon. Eerst wordt het onderste deel in contact gebracht met 4MUP. De gemeten fluoresentie is evenredig met de hoeveelheid antilichamen aanwezig in het serum of plasma. Vervolgens wordt het bovenste deel in contact gebracht met het substraat. Hier is de fluorescentie in verhouding met de hoeveelheid p24Ag aanwezig in het serum.
Gevoeligheid / Specificiteit
Grenswaarden voor resultaat:
< 0,25 voor Ag EN Ab: negatief
≥ 0,25 voor Ag OF Ab: reactief
Termijn voor resultaat (TAT):
5 werkdagen na staalontvangst op het ARL
Op een nylon strip zijn volgende controlelijnen en eiwitten aangebracht:
• Controlelijnen:
- Streptavidin controle: negatief of < level +/-
- Sterk positieve controle (level 3+): anti- humane immunoglobuline
- Cut-off lijnen level 1+ en level +/-: humaan IgG
• Recombinante eiwitten die specifieke antilichamen detecteren tegen:
- HIV -1 : sgp 120 en gp 41
: p31, p24 en 17
- HIV-1- subtype 0 : sgp 120
- HIV-2 : gp 36 en sgp 105
In een samen met de kit geleverd plastic houdertje wordt verdunningsbuffer gebracht. Hierin wordt staal gepipetteerd en een nylon strip gelegd. De specifieke antilichamen in het staal binden zich tijdens de 1ste incubatieperiode op de gecoate HIV-antigenen. Tijdens een wasprocedure worden de ongebonden componenten weggewassen. Een conjugaat, bestaande uit anti-humaan IgG gekoppeld aan alkalische fosfatase, bindt zich tijdens de 2de incubatieperiode met elk gevormd antigeen/anti-lichaam complex op de strip. Na een 2de wasprocedure wordt een substraat/chromogeenoplossing toegevoegd. Gedurende de 3de incubatie verschijnt, op de plaats waar het specifieke antigen werd gemerkt, een donkerblauw bandje (de kleurintensiteit is evenredig met de hoeveelheid specifiek antilichaam in het staal). De reactie wordt gestopt door toevoeging van zwavelzuur.
Gevoeligheid / Specificiteit
De INNO-LIA HIV I/II score test heeft een specificiteit van 95% en is geschikt voor de detectie van zowel HIV-1 als HIV-2.
In de fase van vroege seroconversie heeft deze test een lagere gevoeligheid dan de andere gebruikte screeningstesten. Daarom wordt steeds de combinatie gemaakt van de beschikbare testen.
Termijn voor resultaat (TAT):
5 werkdagen na staalontvangst op het ARL
Meer info betreffende deze test is terug te vinden op de website van Fujirebio.
Instructies voor aanvragen
Gegevens die minimaal moeten ingevuld zijn op het aanvraagformulier:
• Persoonsidentificatie (initialen, geboortedatum, geslacht, rijksregisternummer)
• Identificatie van de aanvragende arts of laboratorium
(naam, voornaam, identificatienummer en adres)
• Type staal
• Datum en bij voorkeur ook de tijd van afname
• Klinische inlichtingen nuttig voor het uitvoeren van analysen en voor het
interpreteren van de resultaten
• Gewenste analyse
• Datum en handtekening van de aanvragende arts/klinisch bioloog
Specifieke gegevens voor confirmatietesten:
• Resultaat van de test die voor screening werd gebruikt
• Type (naam/firma) van de test die voor screening werd gebruikt• Cut-off van de test die voor screening werd gebruikt
Bij de bloedafname is het belangrijk om de identiteit van de persoon te verifiëren en de bloedafnamebuisjes uniek te identificeren.
Het aanvraagformulier van de test kunt u terugvinden bij "Downloads" , rechts bovenaan op deze pagina
Staalafname confirmatietesten
- Mensen hoeven niet aan bepaalde voorwaarden te voldoen voor de bloedafname
- Minimaal volume: 0,5 ml serum of plasma (paars)
- Bewaar bij 4 °C of op kamertemperatuur
- Het staal moet binnen de 5 dagen na afname op het ARL toekomen,
af te leveren op werkdagen (ma-vr) vóór 16u30.
Richtlijnen transport
1. Zorg ervoor dat de buisjes met het staal goed sluiten om lekken te voorkomen
Gebruik bij voorkeur buisjes met een schroefkap
Eventueel dopje en buis met parafilm omwikkelen
2. Het staal in een transportblister of koker verpakken met vochtabsorberend
materiaal
3. Het geheel in een beschermende envelop of doosje plaatsen
4. Een UN3373 sticker en de vermelding ‘Biological Substances Category B’
op de verpakking aanbrengen
versturen
Vakgroep Diagnostische Wetenschappen (GE32)
MRB2 – Ingang 38
Corneel Heymanslaan 10
9000 Gent
