HIV-1 Virale Lading

Het Cobas4800 systeem bestaat uit 2 toestellen: de Cobas X480 (extractor/pipettor) en de Cobas Z480 (Lightcycler).
De extractie van het viraal RNA is een silica-gebaseerde nucleïnezuur capture extractie die wordt uitgevoerd in het Cobas X480 toestel. Reverse transcriptie, amplificatie en detectie gebeuren in de COBAS Z480 analyzer gebruik makend van de door Roche gepatenteerde TaqMan technologie. De methode gebruikt een dubbel fluorescent gelabelde probe met een reporter dye en een quencher dye.

De toename van het fluorescerende signaal wordt gebruikt om de hoeveelheid RNA in het startmateriaal te bepalen.
Teneinde betrouwbare kwantificatie mogelijk te maken wordt bij de extractie een gekende hoeveelheid van een intern standaard RNA (HIV-1 QS RNA) aan elk staal toegevoegd. De master mix voor amplificatie bevat primers en probes specifiek voor zowel het target-specifieke RNA als het QS RNA.

GEVOELIGHEID / SPECIFICITEIT

De detectielimiet van de Cobas 4800 HIV-1 test is 20 kopijen/ml plasma (1,30 log).
Het verschil tussen het resultaat van twee onafhankelijke bepalingen op eenzelfde staal kan oplopen tot 0,3 log en zelfs groter zijn bij lage (< 1000 kopijen/ml) en hoge (> 50000 kopijen/ml) virale loads. Dit is een normale fout op de test en deze waarde wordt vermeld in de bijsluiter van de firma en blijkt ook uit de resultaten van eigen metingen van de interne run controle.
Dit heeft voor gevolg dat verschillen in virale load slechts als significant mogen aanzien worden vanaf een absoluut verschil van 0,5 log.

De test is enkel geschikt voor de bepaling van HIV-1.

Biologische referentie intervallen: Niet van toepassing.

Verdunningen zijn niet aan te raden, maar mogelijk tot maximaal een factor 1/10.

TERMIJN VOOR RESULTAAT (TAT):

5 werkdagen